再次观察透明度，天然玛瑙多为半透明或不透明，透明度略显混沌，有时可见自然水线。人工合成的玛瑙则透明度较好，且没有天然的层次感。此外，真玛瑙石质坚硬润滑，但雕刻时若图案复杂精美，反而价值较高。
如何分辨玛瑙的材质来源？
分辨玛瑙真伪首先看外观，天然玛瑙通常色彩鲜明且有特殊纹理，常见红、黄、蓝、绿等颜色，并常呈现层状或斑驳纹理，质地细腻有光泽。而人工合成的玛瑙往往透明度较好，缺乏层次感，这点需要仔细区分。
最后，天然玛瑙的主要成分是二氧化硅，因与水化二氧化硅交替成层，并夹杂氧化金属而呈现不同颜色。市场上存在人造或染色玛瑙，仅凭外观和硬度难以100%确定真伪，建议寻求专业宝石鉴定机构帮助进行更精确的检测。
其次可以通过硬度来测试，真玛瑙硬度较高，通常在6.5到7之间，能够划割玻璃。用钥匙等低硬度物品轻轻刮擦，若无法留下划痕，则可能是真品。相反，玻璃制品硬度较低，容易被刮出痕迹。